使用C18柱的循環(huán)制備純化案例 三萜皂苷
色譜條件:
色譜柱為C18柱(直徑20×長500mm);流動(dòng)相乙腈:甲醇(3∶2);體積流量5mL/min;柱溫:室溫;檢測波長210 nm和RI檢測器;進(jìn)樣量6mL。
上:紫外譜圖;下:RI譜圖
色譜分離:
將待分樣品溶于流動(dòng)相乙腈:甲醇(3∶2),采用 ODS C18色譜柱分離,分別用UV 檢測器及RI檢測器檢測峰信號(見上)。樣品通過色譜柱時(shí)檢測到4 個(gè)峰信號,保留時(shí)間為50~85min。在保留時(shí)間為50 min 時(shí)啟動(dòng)儀器的循環(huán)系統(tǒng),不收集組分,這樣可以把前面的雜質(zhì)峰除去,只保留樣品峰,從而單獨(dú)使樣品在整個(gè)系統(tǒng)中循環(huán)一次,相當(dāng)于樣品兩次通過C18色譜柱,進(jìn)行兩次分離。在保留時(shí)間為100 min 時(shí)根據(jù)峰信號開始收集各組分。
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